提取分离
40Kg高山三尖杉枝叶用75%乙醇L回流提取3次，每次2h，减压浓缩得到粗提物7.5Kg。将粗提物用2%HCl(v/v)调pH2-3并过滤。酸性滤液用用Na2CO3调pH9-10，然后用CH2Cl2萃取得到PartA，将残渣用Na2CO3调至中性，分别用CH2Cl2，EtOAc，和n-BuOH萃取得到PartB，C和D。PartA经ODS分离（20%to90%MeOH-H2O）得到9个组分AI-AXI，其中AII经MCI（10%to45%MeOH-H2O）洗脱得到组分AIIa-AIIe。AIIb经硅胶柱层析CH2Cl2-MeOH(:1to2:1，v/v)得到七个组分AIIb1-AIIb7。其中AIIb2,AIIb3,andAIIb4三个组分重结晶分别得到化合物9，11，6。AIIb1经SephadexLH-20和semi-preparativeHPLC得到5，8，10。PartB经硅胶柱层析PE-acetone(:1to1:2,v/v)得到七个组分BI–BVII，其中BVII过硅胶柱PE-acetone(10:1to1:3,v/v)得到6个亚组分BVIIa–VIIf，BVIIe过ODS（10%to85%MeOH-H2O）得到七个组分BVIIe1–BVIIe7，BVIIe1经semi-preparativeHPLC得到7和14，BVIIe2重结晶得到3，BVIIe3经semi-preparativeHPLC得到1，2。BVIIe4经MCI（45%to85%MeOH-H2O）得到三个组分BVIIe5(1)–BVIIe5(3)，BVIIe5(1)经semi-preparativeHPLC得到12和13。结构鉴定通过一维谱以及二维谱对新化的结构进行确定，化合物1和2的绝对构型通过ECD计算来确定，绝对构型定为(1R,2S,4R,5R,10R)，其中化合物3和4的结构鉴定方法与1和2类似，在此不做赘述。生源途径推导
该类化合物可能起源于cephalotane-type二萜，经氧化得到中间体i，然后烯基化得到中间体ii，随后氧化得到中间体iii，然后甲基迁移得到iv，随后芳香化得到1，或者经甲基迁移得到v，然后再芳香化得到2。中间体ii经氧化得到vi，然后环氧化得到vii，再氧化得到化合物3。中间体ii经环氧化得到中间体viii，然后再氧化得到化合物4。
细胞*活性测定用台盼蓝排斥实验测定这些化合物对于HL-60和THP-1的细胞*活性，用MTT法测定对于MDA-MB-和PC-3的细胞*活性。对结果分析发现，环庚三烯酮被破坏后活性丧失，在环庚三烯酮环保持完整的前提下，羟基取代远离该环对活性影响较小，而邻近该环会使活性明显降低。另外对于化合物1和2，说明在环庚三烯酮环上发生取代会失去活性。总而言之，本文首次分离得到完整的C20骨架的cephalotane-type二萜，为这些稀缺化合物的生物合成假说提供了进一步的支持证据。细胞*活性研究发现环庚三烯酮环上甲基取代后活性丧失，但其他化合物具有良好的细胞*活性，该类化合物具有开发成抗癌药物的潜力。DOI:10./j.bioorg..杂志：BioorganicChemistry预览时标签不可点收录于话题#个上一篇下一篇